萌新求问，Rt-PCR，qPCR，PCR的区别与不同是什么？ - 知乎
qPCR就是quantity PCR，定量PCR，也是荧光定量PCR，检测基因转录水平的表达量。 PCR就是一种技术，通过高温变性、低温复性，适温延伸的循环来扩增基因片段。 PCR根据不同的实验目的可以分 …
请问qpcr三次生物学重复之间ct值差很多，连带着内参也差很多，但是 …
4. qPCR实验操作的差异: qPCR实验的操作过程，例如RNA提取、逆转录、qPCR反应等，如果存在差异，也会导致CT值差异。 解决方案： 严格控制实验操作: 确保三次生物学重复的实验操作一致，例如 …
测qpcr的样品混合好后，可以4度冰箱保存12小时再去上机测吗？
除了nuclease-free的要求，最好你用的qPCR的DNA polymerase是hot-start的。 DNA polymerase一般都要保存在-20C（多半会冻起来），就是为了最大限度防止酶失活。 如果酶在4度放太久，整体还是不 …
qpcr 的原理是什么？ - 知乎
qPCR在哪里使用？ 由于其强大的优势，qPCR的应用范围非常广泛。 该方法已经存在了很长时间，研究界已经证明了它的可靠性和稳健性。 最明显的是qPCR在分子诊断中的应用，它正在慢慢取代传统方 …
qPCR曲线异常什么原因？扩增曲线平台期下降？ - 知乎
2）qPCR整个反应条件不适宜或引物设计不当导致扩增效率低，建议通过标准曲线确认扩增效率。 3）扩增产物过长，建议用三步法程序扩增或优化引物，扩增产物长度最好不超过300bp。
实时荧光定量PCR（RT-qPCR）
RT-qPCR原理的三个主要步骤： 1 反转录： 使用逆转录酶和特定引物将RNA样品反转录成cDNA。 该步骤将RNA模板转化为更稳定且可扩增的DNA形式。 反转录过程中使用特定引物。 2 PCR扩增： 使用 …
荧光定量PCR是用来干什么的？ - 知乎
1.qPCR试剂盒 按照MIQE要求，我们必须在文章中清楚的描述完整的反应条件，包括PCR的反应体系配置，用的什么试剂盒，制造商是谁，多大的反应体系，用的是染料法还是探针法。 事情并非仅仅描 …
Nature Communications上传实验原始数据时，所有实验结果必须上传3 …
例如，做ELISA实验时一份样品测两个复孔，做qPCR实验时每测一个基因每个cDNA样品测3个复孔，在用细胞系做实验时，每个分组种3-6个孔。 这些都是技术重复。 通常来说，生物学重复的价值高于技 …
qPCR绝对定量如何构建标准曲线？ - 知乎
图1. qPCR绝对定量技术实验流程图 二、qPCR绝对定量标准曲线构建 在上一部分我们介绍了qPCR绝对定量的核心原理是通过构建已知浓度的标准曲线来确定未知样品中靶基因的确切拷贝数。
qRT-PCR 与WB是可以互换的实验吗？ - 知乎
另外，WB有些时候不灵，这实验本身就是半定量的，而且步骤繁多很容易出错，相比之下qPCR要好做一些。 有些 分泌蛋白，跑WB异常的费劲，我以前就做过一个分泌蛋白的课题，在换了好几批抗体和 …